Дослідження титру антитіл в сироватках крові собак і кішок до збудника сказу після щеплення
Якщо Ви збираєтеся перевезти тварину за межі України, то повинні знати правила в’їзду в іншу країну. Умовно, по відношенню до сказу, всі країни можна розділити на 3 категорії:
- країни, неблагополучні по сказу (Україна);
- країни зі стабільною ситуацією;
- країни, вільні від сказу.
До вільних від сказу країн відносяться: Швеція, Мальта. Ірландія, Японія, Нова Зеландія, Австралія, Великобританія та інші острівні держави. У цих країнах не реєструється сказ 1-го генотипу. У країнах, вільних від сказу, існують певні карантинні вимоги до транспортування тварин (і, оскільки правила часто змінюються, краще в посольстві або консульстві країни, куди ви вирушаєте уточнити вимоги до ввезення тварин).
В інші країни ЄС зі стабільною, по сказу, що склалася при наявності стандартного пакета документів антирабічного сертифіката карантинні санкції не застосовуються. З метою стандартизації правил транспортування тварин Європейський парламент 26 травня 2003 прийняв указ, одним з обов’язкових пунктів якого є наявність антирабічного сертифіката на тварину при в’їзді на територію країн, вільних від сказу, або країн зі стабільною ситуацією щодо сказу.
Єдиний надійний спосіб специфічної профілактики сказу – імунізація якісної інактивованої антирабічною вакциною. Одним з показників ефективності застосовуваних вакцин є рівень титру віруснейтралізуючих антитіл у вакцинованих тварин (рівень популяційного антирабічного імунітету). Так як же дізнатися: захищений Ваш підопічний після щеплення проти сказу? Справа в тому, що антирабическая межа захисту дорівнює 0,50 МО / мл. Якщо тир антитіл менше 0,50 МО / мл, то тварина необхідно повторно вакцинувати проти сказу і через 30 діб після щеплення повторно перевірити, зростання титру антитіл. Існують певні чинники, що впливають на формування специфічних антитіл після щеплення, а саме: порода, вид, вік, кратність антирабічної вакцинації тощо. Тому спостереження за титром антитіл у тварини після щеплення проти сказу надзвичайно важливий фактор,
На сьогоднішній день, офіційно, існує два методи оцінки рівня антирабічних антитіл, запропоновані ВООЗ – це RFFIT і FAVN.
- RFFIT (Rapid Fluorescent Focus Inhibitiontest, Smithetal. 1973 Zalanetal., 1975) – це тест швидкого гальмування фокуса флюоресценції.
- FAVN (Fluorescent Antibody Virus Neutralisationtest, Cliqu et etal., 1996) – це тест флуоресцентних віруснейтралізуючих антитіл. Він дозволяє максимально точно, кількісно визначити титр антирабічних антитіл в МО / мл.
Обидва методи виконуються на живий культурі клітин з внесенням вірусу сказу в реакцію. Самі по собі ці тести досить трудомісткі і вимагають дорогого устаткування і кваліфікованих фахівців.
В європейське Союзі дослідження щодо виявлення антитіл в сироватках крові собак і кішок до збудника сказу після вакцинації вимагають методом FAVN (Fluorescent Antibody Virus Neutralisationtest).
Цей тест проводиться в лабораторіях, визнаних Європейським Союзом. Список таких лабораторій знаходиться на сайті: https://ec.europa.eu/food/animals/pet-movement/approved-labs_en
При дослідженні титру антитіл тварин на сказ видається довідка міжнародного зразка сертифікованої лабораторії.
Умови перевезення тварини через кордон дізнавайтеся самостійно на сайті Європейської Комісії.
З 1 січня 2012 відповідно до вимог Євросоюзу тварина зможе перетинати кордон мінімум через 3 місяці після дати взяття крові на аналіз титру антитіл на сказ.
Лабораторія не несе відповідальності за несвоєчасно оформлених документів відповідно до цієї вимоги.
Якщо країна походження тварини – країна Євросоюзу і тест флуоресцентних віруснейтралізуючих антитіл був зроблений до виїзду з Євросоюзу, тоді немає необхідності чекати 3 місяці після взяття крові, щоб повернутися до Євросоюзу. При перевезенні тварини власник повинен мати паспорт тварини, в якому є відповідні записи про щеплення, дослідження і результати цих тестів.
Правила відбору та пересилання зразків для дослідження на наявність специфічних антитіл проти сказу методом FAVN:
- Кров для дослідження домашніх тварин на наявність специфічних антитіл проти сказу має відбирати ветеринарний лікар, як мінімум через 30 діб після щеплення (час, необхідний для формування в організмі специфічних антитіл) і не пізніше аніж за 3 місяці до транспортування тварини в країни Європейського Союзу (відповідно до Рішення Європейської Комісії № 576/2013).
- Дослідження крові на наявність специфічних антитіл проводиться лише ідентифікованим (чипованим) тваринам.
- Голодна дієта тварини не впливає на кількість та наявність антитіл в організмі, тому, відбір зразків крові у тварини проводять незалежно від їх годівлі та раціону. У собак, кішок і хутрових звірів кров беруть з латеральної підшкірної вени передпліччя або гомілки, по – 2,5-5,0 мл від тварини, для того, щоб отримати, після її відстоювання чи центрифугування, 0,5-1,0 мл сироватки для подальших досліджень.
Лабораторія приймає зразки цільної крові, за умови її транспортування в термоконтейнері з охолоджувачем. Термін надходження крові до лабораторії з моменту її відбору повинен не перевищувати 3 години.
Якщо немає змоги доставити кров у лабораторію впродовж 3 годин з моменту її відбору, то варто отримати сироватку чи плазму крові.
Для отримання сироватки крові методом відстоювання – після відбору крові її залишають у шприці в вертикальному положенні чи переносять у пробірку та залишають на 1-2 години при кімнатній температурі, після чого ставлять у холодильник при 4-8°С на 5-10 годин. Колір сироватки, що відокремилась, має бути від світло-жовтого до рожевого забарвлення (незначний гемоліз допускається, але прозорість має зберігатись). Сироватку відбирають у пробірку типу «епіндорф» у кількості не менше 0,5 мл бажано з гвинтовою закруткою.
Плазму крові отримують методом центрифугування наступним способом. Кров поміщають у центрифужну пробірку та піддають центрифугуванню зі швидкістю 2-4 тис. обертів за хвилину на мікроцентрифузі впродовж 8-10 хвилин. Після цього, плазму відбирають у пробірку типу «епіндорф» у кількості не менше 0,5 мл. Поміщають пробірку в поліетиленовий пакет із застібкою (зіпер). Пакет – в термоконтейнер (термос) з льодом (Відповідно до “Правил транспортування патологічного/біологічного матеріалу” тара, що використовується для доставлення НЕ повертається!).
Зразки сироватки для зберігання та транспортування можна заморожувати (багаторазове заморожування-розморожування не впливає на результати цих досліджень!).
Неправильно відібрані проби (недостатня кількість сироватки, її гемоліз, непридатність для аналізу), а також проби з порушенням цілісності пробірки – дослідженню не підлягають!
Окрім сироватки крові в лабораторію слід надати (надіслати) пакет документів:
- Супровідний документ з підписом лікаря, який проводив відбір крові та печаткою клініки. Заповнюється українською та англійською мовами (друкованими літерами – на основі паспортних даних).
- Ксерокопію всіх заповнених сторінок паспорта тварини (включаючи сторінки з відміткою про ідентифікацію (номер чіпа) та щеплення). Усі записи в паспорті тварини мають бути заповнені двома мовами одночасно – українською та англійською!
- Ксерокопію першої сторінки закордонного паспорта власника або особи, яка супроводжуватиме перевезення.
- Копію квитанції про оплату послуги. В призначенні платежу обов’язково вказується прізвище власника та кличка тварини.
- У випадку, якщо бажаєте отримати результати дослідження Новою Поштою додаєте записку з інформацією: місто, відділення чи поштомат Нової Пошти, ПІП та телефон отримувача.
Зразки на дослідження можна переслати Новою поштою у відділення № 286 м. Києва (вул. Васильківська, 32) отримувач Микола Іванов +380501913383.